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QIAGEN總RNA小量提取試劑盒RNeasy Mini Kit 74104 74106

詳細(xì)介紹：

從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA
數(shù)分鐘內(nèi)快速純化得到高品質(zhì)總RNA
即用型RNA在各種下游應(yīng)用中表現(xiàn)良好
少量起始樣本，RNA產(chǎn)量穩(wěn)定
無(wú)需酚/ 氯f(wàn)ang抽提，無(wú)需氯化銫梯度離心，無(wú)氯化鋰或者乙醇沉淀步驟

Principle

RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中純化總RNA。RNeasy純化技術(shù)整合了苯酚/異硫氰酸胍裂解的嚴(yán)謹(jǐn)性和硅膠膜純化的速度和純度，簡(jiǎn)化了總RNA純化技術(shù)。純化得到高品質(zhì)的RNA，并且DNA殘留水平達(dá)到zui低。

Procedure

RNeasy Mini Kit可從10–1 x 10⁷個(gè)動(dòng)物或人類(lèi)細(xì)胞中、0.5–30 mg動(dòng)物或人類(lèi)組織中或小于5 x 10⁷個(gè)酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對(duì)樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜（參見(jiàn)"RNeasy Mini spin column"）。RNA結(jié)合到膜上（zui多可結(jié)合100 µg），污染物被洗去。對(duì)于某些對(duì)少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用，可在RNeasy操作過(guò)程中進(jìn)行柱上DNA酶處理，去除DNA殘留。之后可在30–100 µl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA（參見(jiàn)"RNeasy Mini procedure"）。還有各種特殊應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方案可供選擇。

Applications

使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A_260/280比為1.9–2.1（10 mM Tris­·Cl、pH 7.5的溶液中），適用于多種下游應(yīng)用，包括：

• Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡
• 終點(diǎn)式RT-PCR
• 定量real-time RT-PCR
• 芯片分析
• Poly A+ RNA篩選

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